Tra cứu  ›  QTKT khám-chữa bệnh  ›  NHUỘM SISH (VENTANA)

NHUỘM SISH (VENTANA)

Quyết định số: 3338/QĐ-BYT

Ngày ban hành: 09/09/2013 12:00

Đại cương

Xét nghiệm SISH gọi là phương pháp lai tại chỗ gắn bạc nhằm xác định tình trạng khuyếch đại gen Her-2/neu.
 

Chỉ định điều trị

Theo chỉ định của Bác sĩ lâm sàng: chủ yếu các định tình trạng khuyếch đại gen trong ung thư vú, ung thư dạ dày và một số loại ung thư khác để điều trị đích.
 

Chuẩn bị

- Bộ kít Her-2 và CEP17.
- Lam kính, lamen, dung dịch rửa.
- Kính hiển vi quang học.

Các bước tiến hành

- Mẫu mô được cắt mỏng 4 micromet, gắn lên tiêu bản đã được tráng silan.
- Cài đặt chương trình máy
- Dán nhãn và đặt lam vào máy
- Loại paraffin bằng EZprep
- Bộ lộ kháng nguyên bằng dung dịch CC2: 30 phút ở 900C
- Xử trí protease: 16 phút
- Ủ lam với 100 àl probe Her-2 và CEP17 trong 4 phút
- Biến tính DNA trong 20 phút ở 800C
- Lai DNA tyrong 6 giờ ở 370C
- Rửa bằng nước bạc trong 8 phút ở 720C
- Ủ trong dung dịch SIL ISH DNP CHRC và ủ 4 phút
- Ủ 24 phút với RED ISH DIG FR
- Ủ 8 phút với RED ISH DIG FR
- Nhuộm hematoxilin II trong 4 phút
- Nhuộm với dung dịch Bluing trong 4 phút
- Láy lamen ra khỏi máy và làm sạch lam
- Làm khô lam trong 1 giờ ở 600C
- Ngâm lam trong xylen 3 phút x 2 lần
- Gắn lamen và đọc kết quả.

ĐỌC KẾT QUẢ
Đếm tín hiệu trong nhân tế bào ung thư vùng xâm nhập.
- T lệ Her-2/CEP17 < 1,8: không khuyếch đại
- T lệ Her-2/CEP17 ≥ 2,2: có khuyếch đại
- T lệ 1,8 ≤ Her-2/CEP17 < 2,2: khuyếch đại giáp biên cần khảo sát lại
- T lệ 2,5 < Her-2/CEP17 ≤ 5: khuyếch đại thấp
- T lệ Her-2/CEP17 > 5: khuyếch đại cao