Các bài viết liên quan
- XÁC ĐỊNH KHÁNG NGUYÊN Lub CỦA HỆ NHÓM MÁU LUTHERAN
- XÁC ĐỊNH KHÁNG NGUYÊN Lua CỦA HỆ NHÓM MÁU LUTHERAN
- XÁC ĐỊNH KHÁNG NGUYÊN s CỦA HỆ NHÓM MÁU MNS
- XÁC ĐỊNH KHÁNG NGUYÊN Fyb CỦA HỆ NHÓM MÁU DUFFY
- XÁC ĐỊNH KHÁNG NGUYÊN Fya CỦA HỆ NHÓM MÁU DUFFY
- XÁC ĐỊNH KHÁNG NGUYÊN N CỦA HỆ NHÓM MÁU MNS
- XÁC ĐỊNH KHÁNG NGUYÊN M CỦA HỆ NHÓM MÁU MNS
- XÁC ĐỊNH KHÁNG NGUYÊN Kpb CỦA HỆ NHÓM MÁU KELL
- XÁC ĐỊNH KHÁNG NGUYÊN Kpa CỦA HỆ NHÓM MÁU KELL
- XÁC ĐỊNH KHÁNG NGUYÊN Leb CỦA HỆ NHÓM MÁU LEWIS
ĐỊNH DANH KHÁNG THỂ BẤT THƯỜNG (phương pháp gelcard)
Quyết định số: số 2017/QĐ-BYT
Ngày ban hành: 09/06/2014 12:00
Đại cương
Kỹ thuật định danh kháng thể bất thường được dựa trên nguyên lý của phản ứng
ngưng kết, phản ứng giữa kháng nguyên và kháng thể sẽ xảy ra nếu trong huyết
thanh của người bệnh hoặc sản phụ có kháng thể đặc hiệu với các kháng nguyên
tương ứng có trên bề mặt các hồng cầu định danh kháng thể bất thường.
Chỉ định điều trị
Xét nghiệm định danh kháng thể bất thường được chỉ định trong những
trường hợp sau:
- Người hiến máu có kết quả xét nghiệm sàng lọc kháng thể bất thường dương
tính;
- Người bệnh có kết quả xét nghiệm sàng lọc kháng thể bất thường dương tính;
Chống chỉ định
Không có chống chỉ định
Chuẩn bị
1. Ngƣời thực hiện
Bác sĩ; cử nhân; kỹ thuật viên; điều dưỡng trung học.
2. Phƣơng tiện – Hóa chất
2.1. Trang thiết bị:
Máy ly tâm chuyên dụng Scangel.; Máy ủ chuyên dụng Scangel.; Tủ lạnh dựng
sinh phẩm, Máy ly tâm ống thẳng.
2.2 Dụng cụ:
Ống nghiệm thuỷ tinh: 12x75mm; Giá cắm ống nghiệm; Khay men hình chữ
nhật: 25x30 cm; Cốc thuỷ tinh có mỏ loại 500 ml; Bút marker; Pipette tự động,
đầu côn các loại.
2.3 Thuốc thử và hoá chất:
Nước muối sinh lý 0,9%; Nước cất, Bộ panel hồng cầu định danh kháng thể bất
thường của Viện Huyết học Truyền máu trung ương; Tấm gelcard AHG
(Coombs) và tấm gelcard Neutral.
2.4. Mẫu bệnh phẩm:
- Ống máu chống đông bằng EDTA: 2 ml.
312
- Ống máu không chống đông: 5 ml.
2.5. Vật tư tiêu hao:
Sổ ghi kết quả; Phiếu xét nghiệm; Mũ giấy; Khẩu trang; Găng tay; Quần áo
công tác.
3. Thời gian làm xét nghiệm: 120 phút
Các bước tiến hành
1. Chuẩn bị dụng cụ, hoá chất, sinh phẩm trước khi tiến hành xét nghiệm.
2. Nhận bệnh phẩm và phiếu yêu cầu làm xét nghiệm định danh kháng thể
bất thường cho người bệnh, kiểm tra và đối chiếu các thông tin của người bệnh
trên ống máu và phiếu xét nghiệm. Kiểm tra số lượng, chất lượng mẫu máu.
3. Chuẩn bị mẫu huyết thanh và hồng cầu ngƣời bệnh và hồng cầu định
danh kháng thể bất thƣờng 0,8% (1.000 µl dung dịch LISS và 10 µl hồng cầu
khối O1 đến O10 và hồng cầu khối của bệnh nhân). Ly tâm ống máu không chống
đông của người bệnh để tách huyết thanh (2000 vòng/phút x 3 phút).
4. Các bƣớc tiến hành kỹ thuật [1], [2]
a. Định danh kháng thể bất thường ở đi u kiện nhiệt độ phòng 22oC:
- Bước 1: Đánh số thứ tự từ O1 đến O10 và một giếng để làm chứng tự thân lên
tấm gelcard nước muối, ghi thông tin bệnh nhân và ngày làm xét nghiệm lên tấm
gelcard.
- Bước 2: Mở tấm bảo vệ phủ lên các cột gel theo đúng quy định.
- Bước 3: Nhỏ lần lượt 50 µl dung dịch hồng cầu panel định danh kháng thể bất
thường 0,8% đã chuẩn bị ở trên vào các giếng gelcard tương ứng thứ tự từ O1
đến O10.
- Bước 4: Nhỏ 50 µl dung dịch hồng cầu bệnh nhân 0,8% đã chuẩn bị ở trên vào
giếng gelcard chứng tự thân.
- Bước 5: Nhỏ thêm 25 µl huyết thanh của người bệnh vào tất cả các giếng
gelcard trên.
- Bước 6: Ủ tấm gelcard ở nhiệt độ phòng trong vòng 15 phút.
- Bước 7: Ly tâm tấm gelcard trong vòng 10 phút bằng máy quay ly tâm gelcard
chuyên dụng.
- Bước 8: Đọc kết quả theo hướng dẫn của công ty sản xuất sinh phẩm.
b. Định danh kháng thể bất thường ở 37oC và kháng globulin người:
- Bước 1: Đánh số thứ tự từ O1 đến O10 và 1 giếng chứng tự thân lên tấm gelcard
AHG. ghi thông tin bệnh nhân và ngày làm xét nghiệm lên tấm gelcard.
313
- Bước 2: Mở tấm bảo vệ phủ lên các cột gel theo đúng quy định.
- Bước 3: Nhỏ lần lượt 50 µl dung dịch hồng cầu panel sàng lọc kháng thể bất
thường 0,8% đã chuẩn bị ở trên vào các giếng gelcard tương ứng đã được đánh
số thứ tự từ O1 đến O10.
- Bước 4: Nhỏ 50 µl dung dịch hồng cầu bệnh nhân 0,8% đã chuẩn bị ở trên vào
giếng gelcard chứng tự thân.
- Bước 5: Nhỏ thêm 25 µl huyết thanh của người bệnh vào tất cả các giếng
gelcard trên.
- Bước 6: Ủ tấm gelcard ở 37oC 15 phút bằng máy ủ gelcard chuyên dụng.
- Bước 7: Ly tâm tấm gelcard 10 phút bằng máy ly tâm chuyên dụng.
- Bước 8: Đọc kết quả theo hướng dẫn của Nhà sản xuất sinh phẩm.
Tài liệu tham khảo
1. Denise M Harmening (1999) Modern blood banking and transfusion
practices, fourth edition, Book Promotion & Service Co., LTD.
2. Hướng dẫn sử dụng AHG Gel Card và Neutral Gel Card.
3. Thông tư 26/2013/TT- BYT đã được ban hành ngày 16/9/2013 về Hướng
dẫn hoạt động truyền máu.