Dựa trên nguyên lý miễn dịch kiểu Sandwich. Theo phương pháp điện hóa phát
quang (ECLIA). Tổng thời gian của phản ứng 18 phút.
• Giai doạn ủ thứ nhất: Gồm mẫu bệnh phẩm (Huyết tương, huyết thanh) và
một kháng thể kháng -CrossLap đơn dòng đã được gắn với biotin ủ với nhau.
Kháng nguyên (chất cần phân tích) trong mẫu bệnh phẩm được giải phóng từ huyết
thanh huyết tương.
• Giai đoạn ủ thứ hai: Sau khi bổ sung các vi hạt được bao phủ streptavidin và
một kháng thể -CrossLap đặc hiệu đơn dòng có gắn với một phức hợp ruthenium
một phức hơp sandwich được hình thành, phức hợp được gắn kết vào pha rắn do sự
tương tác giữa biotin và streptavidin.
+ Phức hợp phản ứng được đưa vào buồng đo. Tại đây các vi hạt
(microparticles) được giữ lại bằng từ tính trên bề mặt điện cực. Những chất thừa được
rửa đi bằng procell. Một dòng điện một chiều (2 voltage) tác động vào điện cực nhằm
kích thích phát quang và cường độ tín hiệu ánh sáng phát ra có thể đo được bằng bộ
phận nhân quang.
+ Kết quả được tính toán dựa vào đường cong chuẩn thu được bằng cách chuẩn
2 điểm và đường cong gốc được cung cấp từ nhà sản xuất. Nồng độ chất cần định
lượng tỷ lệ thuận với cường độ ánh sáng thu được. 
 

1. Ngƣời thực hiện
- 01 Cán bộ đại học chuyên ngành Hóa sinh miễn dịch và 01 kỹ thuật viên.
2. Phƣơng tiện, hóa chất
2.1. Phương tiện
- Các máy có thể phân tích: Elecsys 1010, 2010, modular analytics e 170, cobas e
411, e 601 và một số máy khác phân tích miễn dịch khác.
- Máy ly tâm
- Tủ lạnh để bảo quản hóa chất và bảo quản QC, mẫu bệnh phẩm
- Pipet các loại, ống sample cup
- Ống nghiệm, đầu côn xanh và vàng
- Giá đựng ống nghiệm
80
2.2.Hóa chất
- Phụ thuộc vào hệ máy phân tích miễn dịch. Hóa chất miễn dịch theo phương pháp
điện hóa phát quang của Roche diagnostic gồm 3 lọ thuốc thử:
+ Lọ thứ nhất (M) - nắp trong, có chứa Streptavidin-coated microparticles
thể tích 6.5 mL: Streptavidin-coated microparticles, 0.72 mg/mL; binding
capacity: 470 ng biotin/ mg microparticles; chất bảo quản.
+ Lọ thứ hai (R1) -nắp màu ghi, có nti-b-CrossLaps - b~biotin thể tích
10 ml: biotinylated monoclonal anti-b-CrossLaps antibody (mouse) 2.5 mg/L;
phosphate buffer 100 mmol/l, pH 7.2; chất bảo quản.
+ Lọ thứ ba (R2) - nắp màu đen, có nti-b-CrossLaps- b~Ru(bpy) thể tích 8
mL monoclonal anti- -CrossLaps antibody (mouse) labeled with a ruthenium
com- plex 2.4 mg/L; phosphate buffer 100 mmol/l, pH 7.2; chất bảo quản.
+ Procell
+ Clean cell
+ Dung dịch chuẩn
+ Quality control (QC): gồm 3 mức: level 1, 2 và 3.
- Thuốc thử được bảo quản ở nhiệt độ 2-80C ổn định đến thời hạn ghi trên hộp.
- Thuốc thử đã mở nắp ổn định 4 tuần trên khay đựng hóa chất của máy (luôn bật)
2.3. Các dụng cụ tiêu hao khác
- Ống nghiệm
- Găng tay, dây garo
- Bông , cồn sát trùng, bơm tiêm hoặc kim lấy máu
3. Ngƣời bệnh
Cần giải thích cho người bệnh và người nhà của họ về mục đích của xét nghiệm.
Người bệnh cần phối hợp để lấy máu theo đúng yêu cầu về thời gian và số lượng.
4. Phiếu xét nghiệm 
Cần có phiếu xét nghiệm ghi rõ trong phiếu yêu cầu xét nghiệm. Thực hiện theo y
lệnh của bác sỹ lâm sàng trên phiếu xét nghiệm 
 

hoặc huyết tương: chất chống đông natri-heparin, EDTA
81
Mẫu huyết thanh, huyết tương có thể ổn định trong24 giờ ở nhiệt độ 2 - 25oC; 3 tháng
ở nhiệt độ -20oC; > 3 tháng ở - 70oC.
 

Dựng đường chuẩn
Phân tích QC: ở cả 3 level: 1, 2 và 3. Khi QC đạt tiến hành phân tích mẫu
2.2. Phân tích mẫu
Mẫu bệnh phẩm nên được tiến hành phân tích trong vòng 2h. Mẫu sau khi ly tâm
được chuyển vào khay đựng bệnh phẩm. Đánh số (hoặc ID của người bệnh); chọn test
và vận hành theo protocol của máy 
 

- Mẫu máu bị huyết tán (khi Hb> 0,5 g / dL) có thể gây giảm nồng độ Beta Crosslap
- Mẫu huyết thanh/huyết tương chỉ để đông lạnh một lần. Mẫu có kết tủa phải được ly
tâm trước khi thực hiện xét nghiệm.
- Đảm bảo các mẫu bệnh phẩm, calibrators và QC ở nhiệt độ phòng khoảng (20 -
25°C) trước khi phân tích.
- Khi để mẫu ở tại phòng có thể bị bốc hơi làm nồng độ Beta Crosslap tăng lên do vậy
nên đậy nắp kín và phân tích trong vòng hai giờ 
 

Phần cấu trúc hữu cơ của xương hơn 90% là collagen type 1. Trong quá trình
chuyển hóa xương bình thường ở người trưởng thành collagen bị thoái giáng và các
mảnh vỡ nhỏ đi vào máu và được bài tiết qua thận. Ở người cao tuổi hoặc bệnh lý
xương (như loãng xương) collagen type 1 bị thoái giáng ở mức độ tăng lên và có sự
gia tăng tương xứng với mức độ của các mảnh vỡ collagen trong máu. Trong các
79
mảnh vỡ này có telopeptides đầu tận C (β-CTx). Việc định lượng chất này trong huyết
thanh hay còn gọi b-CrossLaps có thể đánh giá sự tiêu hủy xương và theo dõi hiệu
quả của liệu trình điều trị như sử dụng một số thuốc chống loãng xương.