Định lượng dựa trên nguyên lý miễn dịch, theo phương pháp hóa phát quang
(CLIA). Phản ứng diễn ra gồm 2 bước:
Bước một: Mẫu bệnh phẩm được ủ với thuốc thử có kháng thể -BNP được bao
phủ bởi các vi hạt từ tính. BNP có trong mẫu bệnh phẩm sẽ kết hợp với kháng thể có
bao phủ các hạt từ tính tạo thành phức hợp.
Bước hai: sau giai đoạn rửa, kháng thể -BNP đã được gắn với acridium lại tiếp
xúc và gắn với phức hợp trên tạo thành phản ứng trong bước hai. Tiếp đến là giai
đoạn rửa 2 sau đó các dung dịch tiền kích hoạt và kích hoạt được thêm vào hỗn hợp
phản ứng. Kết quả phản ứng phát quang xảy ra, cường độ ánh sáng thu được tỷ lệ với
nồng độ BNP có trong mẫu bệnh phẩm. Cường độ ánh sáng được xác định bởi hệ
thống nhân quang. 
 

1. Ngƣời thực hiện:
01 Cán bộ đại học chuyên ngành Hóa sinh miễn dịch và 01 kỹ thuật viên
 

500 test. Anti-BNP (Mouse, Monoclonal) bao phủ các vi hạt trong dung
dịch đệm TRIS với protein có độ ổn định cao và chất bảo quản
CONJUGATE: 1 hoặc 4 lọ chứa 5.9 mL đủ cho phân tích 100 mẫu. Lọ chứa
26.3 mL đủ cho phân tích 500 mẫu, kháng thể BNP
cridinium đánh dấu được gắn với protein trong dung dịch đệm MES có độ ổn
định cao. Nồng độ tối thiểu: 0.1µg/mL và chất bảo quản
SPECMEN DILUENT: 1 hoặc 4 lọ chứa 6.6 mL có thể đủ phân tích 100 test Lọ 27
mL đủ cung cấp cho 500 test. Dung dịch pha loãng mẫu có chứa đệm TRIS có độ ổn
định cao và chất bảo quản
PRE-TRIGGER SOLUTION có chứa 1.32% hydrogen peroxide.
TRIGGER SOLUTION: có chứa 0.35N sodium hydroxide.
92
W SH BUFFER: Gồm có phosphate buffered saline solution và chất bảo quản;
antimicrobial agents Wash Buffer containing phosphate buffered saline
solution và chất bảo quản
2.3. Các dụng cụ tiêu hao khác
- Ống nghiệm
- Găng tay, dây garô
- Bông , cồn sát trùng, bơm tiêm hoặc kim lấy máu
3. Ngƣời bệnh
Cần giải thích cho người bệnh và người nhà người bệnh về mục đích của xét nghiệm
Người bệnh cần phối hợp để lấy máu theo đúng yêu cầu về thời gian và số lượng
4. Phiếu xét nghiệm
Có chỉ định của bác sỹ lâm sàng ghi trên phiếu yêu cầu xét nghiệm 
 

1. Lấy bệnh phẩm
Tiến hành phân tích trên mẫu máu, có thể dùng: Huyết thanh hoặc Huyết tương: dùng
chất chống đông Li-heparin, EDTA
Nên sử dụng ống nghiệm đựng mẫu là plastic
Tính ổn định của mẫu: huyết thanh, huyết tương có thể ổn dịnh:
24 giờ/nhiệt độ 2-25oC; 3 tháng/ nhiệt độ -20oC; Nếu > 3 tháng – 70oC
 

Dựng đường chuẩn
Phân tích QC: ở cả 3 level: 1, 2 và 3. Khi QC đạt tiến hành phân tích mẫu
2.2. Phân tích mẫu
Mẫu bệnh phẩm nên được tiến hành phân tích trong vòng 2h
Mẫu sau khi ly tâm được chuyển vào khay đựng bệnh phẩm
Đánh số (hoặc ID của người bệnh); chọn test và vận hành máy theo protocol.
Máy sẽ tiến hành phân tích 
 

- Các yếu tố có thể ảnh hưởng đến kết quả xét nghiệm:
Khi nồng độ Triglycerid > 33,87 mmol/L (3000 mg/dL); Hemoglobin > 500
mg/dL; Bilirubin > 20 mg/dL
- Xử trí:
Xử trí: Khi lấy mẫu và chuẩn bị mẫu tránh vở hồng cầu, mẫu bị vỡ hồng cầu nên loại
và lấy lại mẫu máu khác. 
 

Pre-pro-peptid gồm 134 gốc acid amin) khi tách ra thành proBNP (108 gốc acid
amin) và một đoạn peptid tín hiệu (25 gốc acid amin). Khi được giải phóng vào máu,
proBNP bị thủy phân tạo thành NT-proBNP (76 gốc acid amin, không có hoạt tính
sinh học) và BNP (32 gốc acid amin, có hoạt tính sinh học). Ở người, NT-proBNP và
BNP có hàm lượng lớn trong cơ tâm thất trái, nhưng cũng có một ít trong mô tâm nhĩ
91
cũng như trong cơ tâm thất phải. Định lượng BNP trong máu được sử dụng để sàng
lọc, chẩn đoán và theo dõi suy tim.