Các bài viết liên quan
ĐỊNH LƯỢNG HOMOCYSTEIN
Quyết định số: 320/QĐ-BYT
Ngày ban hành: 23/01/2014 12:00
Đại cương
Dựa trên nguyên lý miễn dịch sử dụng công nghệ hóa phát quang. Để xác định nồng
độ Hcy toàn phần trong huyết thanh/huyết tương theo phản ứng miễn dịch một bước.
Kết quả phản ứng phát quang xảy ra, cường độ ánh sáng thu được tỷ lệ với nồng độ
Homocystein có trong mẫu bệnh phẩm.
Chuẩn bị
1. Người thực hiện: 01 cán bộ đại học chuyên ngành Hóa sinh miễn dịch và 01 kỹ
thuật viên.
2. Phương tiện, hóa chất
2.1. Phương tiện
- Các máy có thể phân tích: architect I 2000 và một số máy khác
- Máy ly tâm
- Tủ lạnh để bảo quản hóa chất và bảo quản QC, mẫu bệnh phẩm
- Pipet các loại, ống sample cup
- Ống nghiệm, đầu côn xanh và vàng
- Giá đựng ống nghiệm
2.2. Hóa chất
- Vi hạt: 1 hoặc 4 lọ x 5 mL Kháng thể -S-adenosyl L-homocysteine được bao phủ
trên bề mạt các vi hạt trong dung dịch đệm Bis-Tris buffer. Nồng độ tối thiểu:
0.1% solids; Chất bảo quản: sodium azide và các tác nhân kháng khuẩn khác.
- Conjugate: 1 hoặc 4 lọ x 5.7 mL S-adenosyl-L-cysteine (SAC) acridinium-được
đánh dấu được gắn trên bề mặt trong dung dịch đệm citrate Nồng độ tối thiểu: 1
ng/mL và Chất bảo quản: ProClin 300.
243
- Enzym: 1 hoặc 4 lọ x 8.6 mL Recombinant S-adenosyl-L homocysteine hydrolase
(SAHHase) in 4-(2-hydroxyethyl) piperazine- propane sulfonic acid (EPPS)
buffer. Chất bảo quản: sodium azide.
- Reductant: 1 hoặc 4 lọ x 21.5 mL Dithiothreitol (DTT) trong dung dịch đệm
citrate. Dung dịch hòa loãng chứa 100mL.
- ARCHITECT i Multi- ssay Manual Diluent có chứa dung dịch đệm phosphat.
Chất bảo quản: các tác nhân kháng khuẩn.
Các loại thuốc thử, hóa chất khác:
- ARCHITECT i Pre-Trigger Solution: Pre-trigger solution có chứa 1.32% hydrogen
peroxide.
- RCHITECT i Trigger Solution: có chứa 0.35 N sodium hydroxide.
- RCHITECT I wash bufer: Wash buffer có chứa đệm phosphate. Chất bảo quản:
là các tác nhân kháng khuẩn.
2.3. Các dụng cụ tiêu hao khác
- Ống nghiệm
- Găng tay, dây garo
- Bông, cồn sát trùng, bơm tiêm hoặc kim lấy máu.
3. Người bệnh
Cần giải thích cho người bệnh và người nhà về mục đích và ý nghĩa của xét nghiệm.
Người bệnh cần phối hợp để lấy máu theo đúng yêu cầu về thời gian và số lượng.
4. Phiếu xét nghiệm
Có y lệnh của bác sỹ lâm sàng ghi trên phiếu xét nghiệm.
Các bước tiến hành
1. Lấy bệnh phẩm: 3ml máu tĩnh mạch lấy vào ống chống đông Lithium - heparin.
2. Tiến hành kỹ thuật
2.1. Chuẩn bị máy phân tích
Dựng đường chuẩn
Phân tích QC: ở cả 3 level. Khi QC đạt tiến hành phân tích mẫu
2.2. Phân tích mẫu
Mẫu bệnh phẩm nên được tiến hành phân tích trong vòng 2giờ
Mẫu sau khi ly tâm được chuyển vào khay đựng bệnh phẩm
244
Đánh số (hoặc ID của người bệnh); chọn test và vận hành theo protocol của máy
Tai biến và xử trí
Các yếu tố gây nhiễu
- Trị số Hcy có thể tăng ở người có tuổi và hút thuốc
- Một số thuốc có thể làm tăng nồng độ Hcy như: carbamafepin, cycloserin,
Methotrexat, Penicillamin, Phenytoin, Procarbafin.