Nhuộm sợi collagen là phương pháp kết hợp ba màu gồm: một chất

nhuộm nhân Hematoxylinferric, một chất nhuộm bào tương bằng Picro Fuchsin

và một màu trọng lực của collagen là Solution Van Gieson.

Các trường hợp bệnh lý có tăng sinh xơ trong tủy xương ( hội chứng tăng

sinh tủy...).

Không có chống chỉ định.

1. Người thực hiện

01 Kỹ thuật viên hoặc Cử nhân kỹ thuật y có kiến thức chuyên khoa.

2. Phương tiện - Hóa chất

2.1. Dụng cụ

- Kính hiển vi quang học;

- Máy cắt tiêu bản;

- Bàn sấy 37oC;

- Lam kính sạch, mờ một đầu;

- Bể nhuộm tiêu bản dung tích 100ml: 06 chiếc;

- Bể nhuộm tiêu bản dung tích 200ml: 02 chiếc;

- Giá cài tiêu bản vừa bể nhuộm 200ml: 01 chiếc;

- Giá gỗ cài tiêu bản: 02 chiếc;

- Pipette Pasteur: 05 chiếc;

- Gạc thấm nước: 03 chiếc;

- Bút chì: 01 chiếc;

- Lamen 22 x 24 hoặc 22 x 22

2.2. Hóa chất

- Toluen 1,2,3: để sẵn trong 3 bể nhuộm 100ml;

- Cồn Etylic 80o, cồn tuyệt đối 1,2 để sẵn trong bể nhuộm 100ml;23

- Dung dịch Hematoxylinferric;

- Dung dịch Picro Fuchsin;

- Dung dịch Solution Văn Gieson;

- Boom Canada: Để nóng chảy ở 60oC lượng vừa phải.

3. Bệnh phẩm

Lốc nến mảnh sinh thiết tủy xương.

4. Phiếu xét nghiệm

1. Chuẩn bị tiêu bản

- Đúc khuôn parafin mảnh sinh thiết tủy xương đã được xử lý, làm nguội

và để lạnh 28oC.

- Cắt tiêu bản mỏng 0,2 m, dán trên lam kính.

- Sấy khô tiêu bản trong tủ ấm 37oC trong thời gian 3 giờ.

2. Tiến hành nhuộm

- Ngâm tiêu bản trong dung dịch Toluen (15 phút), cồn 80o (5 phút) và

cồn tuyệt đối (10 phút);

- Rửa dưới dòng nước chảy nhẹ: 5 phút;

- Nhuộm dung dịch Hematoxylinferric: 510 phút;

- Rửa dưới nước chảy nhẹ: 5 phút;

- Nhuộm trong dung dịch Picro Fuchsin: 35 phút;

- Rửa dưới nước chảy nhẹ: 5 phút;

- Nhuộm dung dịch Solution Van Gieson: 1 3 phút;

- Rửa dưới nước chảy nhẹ: 5 phút;

- Nhúng trong cồn 95o: 10 giây;

- Loại bỏ nước bằng cồn tuyệt đối;

- Loại bỏ cồn, làm trong bằng Toluen;

- Gắn Boom Canada và sấy khô tiêu bản.

- Tiêu bản không được đảm bảo gắn chặt trên lam, thời gian để khô chưa

đạt;

- Rửa nước không kỹ sau mỗi bước nhuộm hóa chất;

- Thời gian nhuộm không đúng quy trình chuẩn, hoặc tùy kích thước của

bệnh phẩm mà có thời gian nhuộm khác nhau;

Kỹ năng chuyên môn của kỹ thuật viên chưa tốt