Trong môi trường nuôi cấy có các chất kích thích phát triển thích hợp tế
bào gốc sẽ phát triển thành các cụm biệt hóa của các dòng tế bào khác nhau.
Dựa vào phương pháp này để đánh giá chất lượng khối tế bào gốc.
Nguồn gốc kỹ thuật: Theo quy trình kỹ thuật của AABB. 
 

- Máu dây rốn;
- Tế bào gốc máu ngoại vi;
- Dịch tủy xương. 
 

Không có chống chỉ định. 
 

1. Ngƣời thực hiện:
Người thực hiện: được đào tạo để thực hiện kỹ thuật.
2. Phƣơng tiện - Hóa chất
2.1. Phương tiện:
- Tủ an toàn sinh học;
- Tủ nuôi cấy tế bào;
- Kính hiển vi đảo ngược;
- Máy trộn Votex;
- Micro-pipet;
- 02 ống nghiệm 1ml;
- 06 đĩa Petri d=35mm; 02 đĩa Petri d=100mm;
- 40 ống nghiệm 10ml có nắp tiệt trùng;
- 01 kim Catheran; 01 bơm tiêm một lần 3ml, 02 kim 18G.
2.2. Hóa chất
- Methycellulose (MethoCult GF H4434V);
- Nước cất.
3. Mẫu bệnh phẩm
Mẫu tế bào gốc máu dây rốn, tế bào gốc tủy xương, tế bào gốc máu ngoại vi.

 

1. Nuôi cấy tế bào:
365
- Giải đông lọ môi trường methycellulose;
- Trộn kỹ mẫu máu trên máy votex;
- Dùng micro-pipet hút mẫu máu theo theo thể tích:
+ Hút 2 µl nếu mật độ tế bào nuôi cấy < 40 G/l;
+ Hút 1 µl nếu mật độ tế bào nuôi cấy > 40 G/l.
- Cho mẫu máu vừa hút vào ống chứa 2,5ml MethoCult GF H4434V:
- Dùng bơm tiêm 1ml, kim 18G rút chính xác 1ml cho vào đĩa petri
d=35mm. Xoay tròn đĩa để môi trường phủ đều khắp mặt đĩa petri;
- Tiến hành tương tự với đĩa thứ 2;
- Đặt 2 đĩa nuôi cấy vào trong đĩa petri d=100mm, đặt thêm một đĩa petri
bỏ nắp d=35mm có khoảng 0,5ml nước cất;
- Đậy nắp đĩa petri d=100mm, ghi mã số mẫu và ngày thực hiện;
- Cho đĩa môi trường vào tủ nuôi cấy tế bào ở nhiệt độ 37oC, 5% CO2;
- Ghi theo dõi: mã, thể tích, ngày cấy mẫu, ngày đọc kết quả... 
 

1. Emer Clarke. Colony forming cell assays for determining potency of cellular
therapy products. Cellular Therapy: Principle, Method and Regulation, Bethesda,
MD:AABB, 2009, chapter 48, p.573-580.