Hệ thống thông tin Sức khỏe Việt

Dựa vào đặc điểm và hình dạng, tính chất bắt màu của vi khuẩn khi nhuộm Gram, đặc điểm của khuẩn lạc trên môi trường nuôi cấy, điều kiện khí trường cần cho nuôi cấy và các thử nghiệm sinh vật hóa học để xác định vi khuẩn.

Chuẩn bị

1. Người thực hiện

- Người thực hiện: Nhân viên xét nghiệm đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên ngành Vi sinh.

- Người nhận định và phê duyệt kết quả: Người có trình độ đại học hoặc sau đại học về chuyên ngành Vi sinh

2. Phương tiện, hóa chất (Ví dụ hoặc tương đương):

2.1 Trang thiết bị:

- Tủ an toàn sinh học cấp 2

- Tủ ấm thường, tủ ấm CO2

- Kính hiển vi

- Lò hấp

- Máy đo độ đục chuẩn

- Máy tính cài phần mềm đọc API (nếu có)

- Hộp nuôi cấy kín

2.2 Dụng cụ, hóa chất và vật tư tiêu hao (bao gồm nội kiểm, ngoại kiểm)

STT	Chi phí hóa chất, vật tư tiêu hao	Đơn vị
1	Môi trường vận chuyển bệnh phẩm	lọ
2	Môi trường nuôi cấy vi hiếu khí	đĩa
3	Túi Genbag vi hiếu khí	túi
4	Bộ định danh API	bộ
5	Dung dịch Oxydase	ml
6	Thuốc nhuộm tím Gentian	ml
7	Lugol	ml
8	Cồn tẩy màu 95°	ml
9	Thuốc nhuộm đỏ Fucsin	ml
10	Dầu soi kính	ml
11	Cồn 70° lau tủ an toàn sinh học	ml
12	Đầu côn 200µl vô trùng	cái
13	Lam kính	cái
14	Que cấy nhựa vô trùng	cái
15	Tube plastic 5 ml vô trùng	cái
16	Khay đựng bệnh phẩm	cái
17	Hộp vận chuyển bệnh phẩm	cái
18	Dung dịch xà phòng rửa tay	ml
19	A xít ngâm lam	ml
20	Mũ bảo hộ	cái
21	Khẩu trang	cái
22	Găng tay	đôi
23	Giấy lau bề mặt tủ an toàn	tờ
24	Dung dịch khử trùng	ml
25	Găng xử lý dụng cụ	đôi
26	Bút viết kính	cái
27	Bút bi	cái
28	Túi đựng rác	cái
29	Áo phòng xét nghiệm	cái
30	Sổ xét nghiệm	tờ
31	Giấy trả kết quả xét nghiệm	tờ
32	Nội kiểm tra chất lượng (QC)* (nếu thực hiện)
33	Ngoại kiểm tra (EQAS)* (nếu thực hiện)

* Ghi chú:

- Chi phí nội kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình nội kiểm (QC) là 1/10 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lượng > 10 mẫu cho 1 lần tiến hành kỹ thuật).

- Chi phí ngoại kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình ngoại kiểm (EQAS) là 1/200 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lần ngoại kiểm trung bình 4 lần/1 năm).

3. Bệnh phẩm

Tất cả bệnh phẩm được chỉ định nuôi cấy tìm vi khuẩn vi hiếu khí.

4. Phiếu xét nghiệm

Điền đầy đủ thông tin theo mẫu phiếu yêu cầu

Các bước tiến hành

1. Lấy bệnh phẩm

Theo đúng quy định của chuyên ngành Vi sinh.

2. Tiến hành kỹ thuật

- Nhuộm soi bệnh phẩm, đánh giá sơ bộ

- Cấy bệnh phẩm trên môi trường nuôi cấy

- Ủ ấm trong điều kiện khí trường tối ưu phù hợp, nhiệt độ thích hợp và trong thời gian phù hợp với tùy loại căn nguyên cần tìm kiếm.

- Lấy khuẩn lạc nghi ngờ nhuộm Gram, thử tính chất sinh vật hóa học đơn giản, định danh bằng bộ API.

Tai biến và xử trí

- Quy trình này chỉ áp dụng cho nuôi cấy và định danh tìm vi khuẩn vi hiếu khí trong các loại bệnh phẩm.

- Kết quả âm tính không có nghĩa là không có vi khuẩn gây bệnh trong bệnh phẩm, mà chỉ khẳng định là không tìm thấy vi khuẩn gây bệnh có thể phân lập được bằng quy trình nuôi cấy này.

- Bệnh phẩm lấy, vận chuyển và bảo quản không đúng yêu cầu có thể đưa đến kết quả âm tính hoặc dương tính giả