Hệ thống thông tin Sức khỏe Việt

Huyền dịch vi khuẩn được cấy vào môi trường không thuốc và môi trường chứa thuốc kháng sinh theo các nồng độ khác nhau. Xác định môi trường có nồng độ thuốc kháng sinh thấp nhất mà vi khuẩn không mọc, đây chính là nồng độ ức chế tối thiếu (MIC) của thuốc với vi khuẩn.

Chuẩn bị

1. Người thực hiện:

- Người thực hiện: Người thực hiện đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên ngành Vi sinh.

- Người nhận định và phê duyệt kết quả: Người thực hiện có trình độ đại học hoặc sau đại học về chuyên ngành Vi sinh.

2. Phương tiện, hóa chất (Ví dụ hoặc tương đương)

2.1. Trang thiết bị

- Tủ an toàn sinh học cấp 2A

- Tủ chuẩn bị môi trường (clean bench).

- Tủ ấm

- Máy ủ nhiệt.

- Tủ lạnh.

- Tủ âm sâu.

- Máy Vortex

- Máy đo độ đục.

- Nồi hấp tiệt trùng.

- Cân điện tử.

- pipet tự động 200ul, 1000ul.

- Pipet aid (Thiết bị hỗ trợ hút pipet)

2.2. Dụng cụ, hóa chất và vật tư tiêu hao (bao gồm nội kiểm, ngoại kiểm)

STT	Chi phí hóa chất, vật tư tiêu hao	Đơn vị tính
1	Bedaquiline	gram
2	7H11 agar	gram
3	Glycerol	ml
4	DMSO	ml
5	Cồn 70°	ml
6	Nước cất	ml
7	Presept 2,5	viên
8	Microshiel	ml
9	MacFaland số 1, 0.25, 0.5, 4.0	ống
10	Dung dịch rửa dụng cụ thủy tinh	ml
11	phoenix ID Brorth	tubes
12	Tubes nước muối + tween	tubes
13	Chung chuẩn quốc tế H37 Rv	ống
14	Đĩa Pertri (90mm), chất liệu nhựa Polystyrene.	đĩa
15	Tuýp 15ml chất liệu nhựa Polystyrene.	Cái
16	Pipet 5ml chất liệu nhựa Polystyrene.	Cái
17	Pipet 25ml chất liệu nhựa Polystyrene.	Cái
18	Túi plastic có khóa	Cái
19	que cấy nhựa vô trùng	Cái
20	Đầu côn 200 µl	Cái
21	Đầu côn 1000 µl	Cái
22	Eppendorf 1,5 ml	Cái
23	Tuýp thủy tinh trung tính đáy tròn	Cái
24	Pipette Paster nhựa vô trùng	Cái
25	Tuýp lưu chủng	Cái
26	Hộp lưu chủng	Cái
27	Tuýp thủy tinh trung tính nút xoáy	Cái
28	Bông thấm nước	gam
29	Bi thủy tinh 3 mm	viên
30	Túi nilon loại 2 lớp chịu nhiệt hấp	cái
31	Túi rác vàng hủy vật liệu lây nhiễm	cái
32	Thùng rác có nắp	cái
33	Thùng vận chuyển vật liệu lây nhiễm	cái
34	Pipette nhựa 10ml	cai
35	Chai thủy tinh trung tính 1000ml	cái
36	Khay ủ ống cấy	cái
37	Giá cắm tuýp ống cấy	cái
38	Chổi rửa tuýp, dụng cụ	cái
39	Bình cầu 2000ml	cái
40	ống đong 500 ml	cái
41	ống đong 50 ml	cái
42	Cốc có mỏ 500ml	cái
43	Cốc có mỏ 200 ml	cái
44	Khăn lau tay	cái
45	Khẩu trang N95	cái
46	Găng sạch	đôi
47	Găng tay hộ lý	đôi
48	Quần áo bảo hộ	bộ
49	Quần áo công tác	bộ
50	Bút chì	Cái
51	Bút dạ	Cái
52	Bút bi	cái
53	Sổ lưu kết quả xét nghiệm	trang

* Ghi chú: Chi phí ngoại kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình ngoại kiểm (EQAS) là 1/10 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lần ngoại kiểm 1 lần /năm từ PXN chuẩn quốc tế 35,000đ/XN)

3. Bệnh phẩm

Chủng M.tuberculosis thuần tuổi chủng từ 21 ngày đến 28 ngày.

4. Phiếu xét nghiệm

Điền đầy đủ thông tin theo mẫu yêu cầu

Các bước tiến hành

1. Chuẩn bị thuốc Bedaquiline (BDQ)

2. Chuẩn bị môi trường đặc 7H11

3. Chuẩn bị huyền dịch vi khuẩn.

4. Cấy huyền dịch vi khuẩn vào môi trường đặc 7H11 và ủ ấm

Tai biến và xử trí

1. Sai sót

- Chuẩn bị môi trường không đạt chất lượng

- Pha thuốc không đúng nồng độ

- Pha huyền dịch vi khuẩn loãng hoặc đặc

- Chất lượng kháng sinh: pha không chuẩn, bảo quản sai…

- Nhiễm chéo trong quá trình thao tác kỹ thuật.

- Thực hành không an toàn.

2. Xử lý

- Giá trị MIC của chủng H37Rv chấp nhận được trong khoảng 0.015 - 0.12 ug/ml. Nếu giá trị MIC của H37Rv nằm ngoài khoảng trên thì cần thực hiện lại KSĐ.

- Chú ý: Số lượng khuẩn lạc trong các đĩa môi trường không chứa thuốc kháng sinh đạt tiêu chuẩn là 50 khuẩn lạc / đĩa 10-5, 500 khuẩn lạc / đĩa 10-4, 5000 khuẩn lạc / đĩa 10-3. Số lượng khuẩn lạc chấp nhận được ở các đĩa môi trường như sau: 10-100 khuẩn lạc/ đĩa 10-5, 100-1000 khuẩn lạc/ đĩa 10-4, 1000-10000 khuẩn lạc/ đĩa 10-3. Nếu số lượng khuẩn lạc nằm ngoài khoảng trên, kết quả kháng sinh đồ không đủ tin tưởng, cần thực hiện lại.