Hệ thống thông tin Sức khỏe Việt

Kỹ thuật TRCReady MTB nhằm khuếch đại và phát hiện trình tự đích dựa trên sự kết hợp của phản ứng phiên mã ngược và phiên mã. Kỹ thuật TRC khuếch đại và phát hiện ARN đích trong cùng một bước thông qua sự kết hợp phản ứng khuếch đại đẳng nhiệt ARN và đầu dò phát huỳnh quang hoạt động theo hình thức cài xen (Intercalation activating fluorescence - INAF). TRCReady MTB khuếch đại và phát hiện ARN 16S. Đồng thời, kit cũng chứa chứng nội để phát hiện chất ức chế phản ứng khuếch đại ARN. Phản ứng khuếch đại được phát hiện trong thời gian thực bằng cách đo mật độ huỳnh quang phát ra do sự liên kết của trình tự ARN đích với probe INAF. Các phản ứng được thực hiện điều kiện đẳng nhiệt 46°C

Chuẩn bị

1. Người thực hiện:

- Người thực hiện: Nhân viên xét nghiệm đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên ngành Vi sinh (và/hoặc sinh học phân tử/ sinh học/công nghệ sinh học).

- Người nhận định và phê duyệt kết quả: Người thực hiện có trình độ đại học hoặc sau đại học về chuyên ngành Vi sinh (và/hoặc sinh học phân tử/ sinh học/công nghệ sinh học).

2. Phương tiện, hóa chất (Ví dụ hoặc tương đương):

2.1. Trang thiết bị

- Máy TRCReady-80

- Máy tính được cài sẵn phần mềm TRCReady-80

- Bộ lưu điện

- Đồng hồ bấm giờ

- Máy ly tâm tuýp 50 ml

- Tủ an toàn sinh học cấp 2

- Máy vortex

- Máy ủ nhiệt khô (với giới hạn nhiệt độ >80°C)

- Máy ly tâm tuýp 1,5 ml (với lực ly tâm đạt 10000 g)

- Máy spindown (để ly tâm nhẹ, không bắt buộc)

- Máy in (không bắt buộc)

2.2. Dụng cụ, hóa chất và vật tư tiêu hao (bao gồm nội kiểm, ngoại kiểm)

STT	Chi phí hóa chất, vật tư tiêu hao	Đơn vị
1	TRC MTB	test
2	TRCR Purification kit	test
3	TRCR MTB-Lysis reagent	test
4	TRCR TIP SET	test
5	KH2PO4	gam
6	Na2HPO4	gam
7	Nước cất	ml
8	NaOH	gam
9	NaCitrat	gam
10	NALC	mg
11	Cồn 70%	ml
12	Presept	viên
13	Microshiel	ml
14	Tuýp Falcon 50 ml	tuýp
15	Đầu côn 200 µl có lọc	cái
16	Đầu côn 1000 µl có lọc	cái
17	Tuýp 1,5 ml có nắp xoáy	cái
18	Giá cắm tuýp 1,5 ml	cái
19	Giá cắm tuýp 50 ml	cái
20	Khay đựng bệnh phẩm	cái
21	Khăn giấy	tờ
22	Khăn lau tay	cái
23	Găng tay không bột tan	đôi
24	Quần áo bảo hộ	cái
25	Quần áo công tác	bộ
26	Thùng vận chuyển vật liệu lây nhiễm	cái
27	Thùng rác có nắp	cái
28	Túi rác vàng hủy vật liệu lây nhiễm	cái
29	Bút dạ	Cái
30	Bút bi	cái
31	Sổ lưu kết quả xét nghiệm	trang
32	Giấy trả kết quả xét nghiệm	Tờ
33	Nội kiểm
34	Ngoại kiểm

3. Bệnh phẩm

- Hầu hết các loại bệnh phẩm từ các tổn thương nghi lao. Ngoài ra, có thể dùng chủng nuôi cấy dương tính.

4. Phiếu xét nghiệm

Điền đầy đủ thông tin theo mẫu yêu cầu

Các bước tiến hành

Các bước tiến hành thực hiện theo phương tiện, hóa chất được ví dụ ở trên.

1. Xử lý bệnh phẩm: Khử nhiễm bệnh phẩm (nếu cần)

2. Tiến hành kỹ thuật

2.1. Phân giải (lysis)

2.2. Chuẩn bị hóa chất cho bước tách chiết và phát hiện

2.3. Chạy phản ứng

2.4. Xem kết quả

Tai biến và xử trí

* Các trường hợp không phù hợp của chứng và cách xử lý

Chứng dương có kết quả Invalid#1, thực hiện các bước kiểm tra như sau:

Bước	Cách xử lý
1	Kiểm tra vị trí chứng dương có đúng như khai báo không
2	Kiểm tra điều kiện bảo quản có phù hợp không

Chứng âm có kết quả Invalid#1, Invalid#2 thực hiện bước kiểm tra sau:

Bước	Cách xử lý
1	Kiểm tra vị trí chứng âm có đúng như khai báo không

*Các thông báo lỗi khác: Tham khảo hướng dẫn của nhà sản xuất