Các bài viết liên quan
- Virus PCR
- Norovirus test nhanh
- MTB (Mycobacterium tuberculosis) kháng thuốc Bedaquiline MIC trên môi trường thạch
- MTB (Mycobacterium tuberculosis) kháng thuốc MIC trên môi trường lỏng
- MTB (Mycobacterium tuberculosis) định danh TB-LAMP
- MTB (Mycobacterium tuberculosis) kháng INH nồng độ cao môi trường lỏng
- MTB (Mycobacterium tuberculosis) định danh TRCReady
- Vi sinh vật nhiễm khuẩn đường ruột Real-time PCR đa tác nhân
- Vi sinh vật nhiễm khuẩn hô hấp Real-time PCR đa tác nhân
- Vi sinh vật nhiễm khuẩn não-màng não Real-time PCR đa tác nhân
Paragonimus (Sán lá phổi) Ab miễn dịch bán tự động
Quyết định số: 6769/QĐ-BYT
Ngày ban hành: 08/11/2018 12:00
Đại cương
1. Mục đích
Phát hiện kháng thể IgG kháng với Paragonimus có trong mẫu huyết thanh.
2. Nguyên lý
Phát hiện kháng thể IgG kháng với Paragonimus có trong mẫu huyết thanh bằng kỹ thuật miễn dịch gắn men (ELISA).
Chuẩn bị
1. Người thực hiện
- Người thực hiện: Nhân viên xét nghiệm đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên ngành Vi sinh/Ký sinh trùng.
- Người nhận định và phê duyệt kết quả: Người thực hiện có trình độ đại học hoặc sau đại học về chuyên ngành Vi sinh/Ký sinh trùng.
2. Phương tiện, hóa chất (Ví dụ hoặc tương đương)
2.1. Trang thiết bị
- Máy đọc ELISA.
- Máy ly tâm
- Tủ lạnh 2ºC -8ºC
- Micropipette 10 µl, 200 µl, 1000 µl.
- Giá đựng ống máu
- Ống nghiệm.
- Ống đong chia vạch.
- Giấy thấm.
2.2. Dụng cụ, hóa chất và vật tư tiêu hao (bao gồm nội kiểm, ngoại kiểm)
STT | Chi phí hóa chất, vật tư tiêu hao | Đơn vị |
1 | Giấy xét nghiệm | Tờ |
2 | Tube lấy bệnh phẩm | Cái |
3 | Mũ | Cái |
4 | Khẩu trang | Cái |
5 | Găng tay | Đôi |
6 | Găng tay xử lý dụng cụ | Đôi |
7 | Quần áo bảo hộ | Bộ |
8 | Bút viết kính | Cái |
9 | Bút bi | Cái |
10 | Sổ lưu kết quả xét nghiệm | Quyển |
11 | Dung dịch rửa tay | ml |
12 | Khăn lau tay | Cái |
13 | Panh | Cái |
14 | Khay đựng bệnh phẩm | Cái |
15 | Hộp vận chuyển bệnh phẩm | Cái |
16 | Đầu côn 10 ml | Cái |
17 | Đầu côn 200 ml | Cái |
18 | Đầu côn 1000 ml | Cái |
19 | Pipet nhựa | Cái |
20 | Sinh phẩm chẩn đoán (QC) | Test |
21 | Sinh phẩm chẩn đoán | Test |
22 | Ngoại kiểm (EQAS) (nếu thực hiện) * |
|
* Ghi chú:
- Chi phí ngoại kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình ngoại kiểm (EQAS) là 1/200 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lần ngoại kiểm trung bình 2 lần/1 năm).
3. Bệnh phẩm
Huyết thanh
4. Phiếu xét nghiệm
Điền đầy đủ thông tin theo mẫu phiếu yêu cầu
Các bước tiến hành
1. Lấy bệnh phẩm
Theo đúng quy định của chuyên ngành Vi sinh (xem Phụ lục).
2. Tiến hành kỹ thuật
Bộ sinh phẩm chẩn đoán của Scimedx (USA) (VD)
2.1. Lấy bộ kít ra khỏi tủ lạnh, lấy đủ số giếng cần làm.
2.2. Nhỏ chứng dương, chứng âm và mẫu huyết thanh đã pha loãng 1/64 vào mỗi giếng.
2.3. Ủ ở nhiệt độ 15°C -25°C trong 10 phút
2.4. Rửa với dung dịch rửa đã pha loãng, lắc sạch nước.
2.5. Thêm Conjugate vào mỗi giếng, ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút.
2.6. Rửa với dung dịch rửa đã pha loãng, lắc sạch nước.
2.7. Nhỏ TMB vào mỗi giếng ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút.
2.8. Nhỏ Stop Solution.
Tai biến và xử trí
1. Sai sót
Có thể xảy ra hiện tượng âm tính giả hoặc dương tính giả, thông thường do:
- Thực hiện sai các bước trong quy trình hướng dẫn.
- Chứng âm và những mẫu bệnh phẩm âm tính bị nhiễm chéo bởi huyết thanh/ huyết tương có nồng độ kháng thể cao.
- Dung dịch cơ chất bị nhiễm bởi các tác nhân oxid hoá (thuốc tẩy, ion kim loại v.v…)
- Dung dịch dừng phản ứng bị nhiễm bẩn.
2. Xử trí
- Tuân thủ đúng các bước qui trình hướng dẫn của nhà sản xuất và hướng dẫn về độ ổn định hóa chất xét nghiệm trong bộ sinh phẩm sử dụng.
Kiểm tra và vệ sinh máy rửa thường xuyên trước và sau khi làm xét nghiệm